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            透景生命体外诊断试剂专业厂商

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            人K-RAS基因7种突变检测试剂盒(PCR荧光法)

            授权产品

            kras突变检测,筛选肺癌、结直肠癌靶向用药人群

            产品概述

            人K-RAS基因突变检测

            人K-RAS基因7种突变检测试剂盒(PCR荧光法)

            检测指标 :

            人K-ras基因12、13位密码子上的常见突变

            预期用途

            检测人K-ras基因12、 13位密码子上的常见突变,用于辅助临床医生筛选出可受益于爱必妥(Cetuximab)和帕尼单抗(Panitumumab)等靶向药物的癌症患者。

            适用机型

            Roche LightCycler480Ⅱ、ABI7500 Real-time PCR detection system

            样本要求

            病理组织

            产品规格

            24人份/盒

            保存条件及有效期

            -20℃及以下避光冷冻存放,试剂盒有效期为9个月。

            注册证号

            国械注准20163401342

            适用机型

            实验室通用的实时荧光PCR平台

              实验室常规荧光PCR技术,兼容不同种类检测

              2小时总检测流程,小于0.5小时手工操作,灵敏特异、快速精确且自动化

            推荐机型
            Roche LightCycler480ⅡABI7500 Real-tie PCR detection syste

            仪器设置:

            ① Roche LightCycler480Ⅱ,Detection Format:Dual Color Hydrolysis Probe/UPL Probe(FAM、VIC/HEX/Yellow555),Reaction Volue:25ul; ② ABI 7500,Reporter Dye:FAM、VIC;Quencher Dye:NONE;Passive Reference:NONE; 注:由于不同仪器的上的软件或软件版本不同,如需要选择实验模式,请选择绝对定量模式进行反应,并且所有孔位均定义为unknown。
            指标意义
            K-RAS突变—肺癌个性化治疗靶点
            K-RAS:

            是EGFR信号通路下游的一种小分子G蛋白,突变后抑制了自身的GTP酶活性,使得K-ras蛋白总是处于活化状态,导致信号通路不受上游EGFR信号指令的调控。研究表明, 结直肠癌患者中K-ras 基因的突变率约为35-40%, 90%的突变发生在12、13位密码子,其中约70%发生于第12位密码子, 30%发生于13位密码子。 多项研究证实K-RAS基因突变状态与西妥昔单抗疗效相关,K-ras基因发生突变时西妥昔单抗治疗无效。

             
            美国国家癌症综合网络(NCCN) 2009年版的临床指南4中明确指出:

            KRAS突变使肺癌患者对EGFR-TKI和结直肠癌的抗EGFR抗体药物产生耐药 ,肿瘤患者接受EGFR靶向药物治疗之前,必须进行KRAS基因突变检测,根据检测结果决定是否使用EGFR靶向药物作为临床治疗措施。

            密码子 12和13(耐药突变)
            检测结果 突变 不突变
            爱必妥、维克替比等单抗类药物 疗效差 疗效好
            人K-ras基因12和13密码子上7种常见突变
            Cosic ID 突变名称 碱基变化 氨基酸变化
            521 Gly12Asp GGT>GAT 甘氨酸到天冬氨酸
            520 Gly12Val GGT>GTT 甘氨酸到缬氨酸
            517 Gly12Ser GGT>AGT 甘氨酸到丝氨酸
            516 Gly12Cys GGT>TGT 甘氨酸到胱氨酸
            522 Gly12Ala GGT>GCT 甘氨酸到丙氨酸
            518 Gly12Arg GGT>CGT 甘氨酸到精氨酸
            532 Gly13Asp GGC>GAC 甘氨酸到天冬氨酸
            产品优势
            通用的荧光PCR平台,快速准确成本低

            通用的荧光PCR检测,成本低廉;
            2小时即可完成整个实验,检测速度快;仪器自动判读结果,更加准确。

            良好的灵敏度,避免漏检

            检测灵敏度高,可检测出样本中低至1%的突变基因

            全面覆盖靶向药物相关位点

            检测位点全,涵盖了与靶向药物吉非替尼等药物药敏或耐药相关突变,为临床提供全面的辅助判断。

            注意事项

            推荐样品类型顺序:
            新鲜病变组织>冰冻病理切片>石蜡包埋病理组织或切片>其它类型标本。

             

            注意:为了保证检测的准确性和提高检测的灵敏度,检测所用的DNA质量非常重要。采集的肿瘤组织经?;岚5淖橹赴?,不同类型的肿瘤样品中正常细胞所占的比例不一样,而福尔马林固定的石蜡切片更会影响到提取DNA的质量和纯度。

            临床应用
            指导抗EGFR单抗类药物的合理使用

            筛查出对导抗EGFR单抗类药物药物敏感的患者,制定出最适合患者的肿瘤治疗方案


             
            监督治疗,节省医疗资源

            B-RAF突变与肺癌患者和结直肠癌患者EGFR靶向治疗的耐药性密切相关,检测B-RAF突变
            可及时发现耐药,辅助临床调整治疗方案,避免资源浪费


             
            品牌介绍

            透景生命,专注于多重检测流式荧光技术应用

            上海透景生命科技股份有限公司(透景生命)成立于2003年,专业从事高端体外诊断产品研发、生产和推广。2017年成功上市。

             

            透景生命立足于自主创新,构建了高通量流式荧光杂交技术平台、高通量流式免疫荧光技术平台、多重荧光PCR技术平台、化学发光免疫分析技术平台等多个技术平台。

             

            透景生命已累计获得100余项医疗器械注册证书,目前已收到117个II类和III类注册证。产品包括20种肿瘤标志物(全自动流式荧光平台),并开创性的打破进口免疫试剂的仪器封闭,研发出可兼容进口平台的肿瘤标志物试剂;基于流式荧光的HPV27全分型产品;全自动自免十五项试剂给临床提供更高速便捷体验,以及全球首创专利产品双基因甲基化检测试剂盒,可用于肺癌早期辅助诊断等创新型产品。

            人K-ras基因7种突变检测试剂盒(PCR荧光法)

            规格:24人份/盒

            组分及储存有效期

            24人份:

            序号 名称 包装 体积 描述
            1 突变位点PCR反应液 7管 550µl PCR反应组分,扩增引物,标记探针,内标
            2 外标PCR反应液 1管 550µl PCR反应组分,扩增引物,标记探针,内标
            3 DNA 聚合酶 2管 30µl 热启动DNA 聚合酶
            4 阳性质控品 1管 80µl 含7种KRAS突变类型的DNA片段
            5 阴性质控品 1管 300µl 野生型正常人基因组
            试剂盒在-20℃及以下避光冷冻存放,试剂盒有效期为9个月。试剂反复冻融5次有效???2~8℃)7天有效,运输4天内有效。

            样本类型

            为了保证检测的准确性和提高检测的灵敏度,检测所用的DNA质量非常重要。采集的肿瘤组织经?;岚5淖橹赴?,不同类型的肿瘤样品中正常细胞所占的比例不一样,而福尔马林固定的石蜡切片更会影响到提取DNA的质量和纯度。
            1.    推荐样品类型顺序:新鲜病变组织>冰冻病理切片>石蜡包埋病理组织或切片>其它类型标本。
            2.    推荐使用商业化的DNA提取试剂盒,所提取的DNA OD260/OD280在1.6-2.0。提取的DNA立即用于检测,或保存于-20℃,保存时间不要超过6个月。
            3.    从新鲜病变组织中取样应确定含有肿瘤病变组织。
            4.    石蜡包埋病理组织或切片应确定含有肿瘤病变组织。
            5.    所用石蜡包埋病理组织或切片保存时间不超过3年。

            适用仪器

              荧光PCR仪
            1 ABI-7500 Real-time PCR detection system
            2 LightCycler® 480 Real-Time PCR System

            CFDA注册证书

            国械注准20163401342

            操作流程


            透景人KRAS基因突变检测试剂盒-操作流程四图合一

            性能指标

            灵敏度 各突变位点最低检测限均优于1%。
            特异性

            特异性参考品符合率:
            a) 采用无相应靶突变序列的野生型人基因组参考品进行测定,结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。
            b) 检测范围外的8种突变参考品进行测定,结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。
            c) 非人类基因组(金黄色葡萄球菌)进行测定,结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。

            重复性 采用经标化的企业参考品,7种突变位点(Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ala、Gly12Arg、Gly12Ser)混合参考品浓度水平为50%进行10次平行检测,结果应为阳性且Ct值的变异系数(CV,%)≤5%。

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