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            透景生命 / 生殖健康相关资料 / 【原创】Y染色体微缺失:剥夺做爸爸权利的罪魁祸首之一

            【原创】Y染色体微缺失:剥夺做爸爸权利的罪魁祸首之一

            Tellgen
            2017-11-01 10:03:49  阅读量:4195
            随着环境恶化和生活节奏的不断加快,国内外不孕不育人口急剧增加,2012年中国人口协会关于《中国不孕不育现状调查报告》数据显示全球有13%夫妇遭受不育的困扰 ,我国不孕不育患者数量已超过4000万,而20年前我国育龄人群中不孕不育率仅为3%,如今已攀升至15%,而男性不育引起的不孕从10年前占35%增加至50%。Y 染色体作为男性性染色体,在男性精子发生和性征维持中承担着非常重要的作用,如Y 染色体Yq11 区的USP9,RMB 和DAZ 等男性特异性基因决定或影响着睾丸组织结构和精子发生过程。因此特定区域的Y 染色体缺失影响到这些基因表达后,精子发生过程就会受到干扰甚至停止发生,从而导致不育症。

            1、Y染色体微缺失发生频率及临床表现
            Y 染色体微缺失在造成男性不育症的遗传因素中居第二位,发生率仅次于克氏综合征。一般人群Y染色体微缺失发生率为1/4,000,但在不育男性中显著升高。无精子症微缺失的发生率要高于少精子症,最新指南指出中国地区Y染色体微缺失缺失频率为11.5%,高于世界平均水平。目前Y染色体微缺失已成为无精、少精和弱精患者的常规检测项目。
            随着微缺失分子机制的阐明和MSY测序完成,结合十多年临床数据分析,专家总结只有下列微缺失模式有明确的临床表现,(图1):
            -AZFa
            -AZFb( P5/P1 近端)
            -AZFbc( P5/P1 远端或 P4/P1 远端)
            -AZFc( b2/b4)
            尽管发现在AZFb与AZFc两区域之间存在新的缺失位点(一些学者认为的AZFd区缺失),但是该区域缺失没有明确的临床意义,也并非独立存在的缺失模式。MSY序列和Y染色体微缺失机制明确显示,第四个区域AZFd实际上并不存在。
             
            图1:Y染色体微缺失模型示意图。

            重复序列(不同的回文序列采用不同颜色标注),相同的序列之间的同源重组最后导致AZFbc区域缺失。STS位置用虚线标示。Y染色体上DAZ基因有四拷贝。
             
            2、谁应该检测Y染色体微缺失?
            当患者精液检测为无精或严重少精时(<5×106/ml)时,建议行Y染色体微缺失筛查。AZF微缺失筛查结果对睾丸穿刺有预后价值:如果诊断为整个AZFa、AZFb和AZFb+c等缺失,想从睾丸中获得精子进行 ICSI 已不大可能,而AZFc区缺失还尚存一丝机会。对无精子症患者推荐用睾丸显微切开取精术替代传统的睾丸穿刺,因为前者精子获取率更高。此外研究发现如果整个AZFc或者部分AZFb和AZFa缺失,那其家族其他男性也可能存在缺失,建议家族其他男性也进行检测。

            3、如何检测Y染色体微缺失?
            虽然目前Y染色体微缺失已经成为临床上男性不育症的重要检测项目,但是在国内仍为有统一的临床指导意见,因为缺乏大规模的临床验证实验。而自1999 年以来,欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控作网一直致力于提高Y染色体微缺失分子诊断的质量,并发布了 Y 染色体微缺失分子诊断指南,提供了一套客观的检测质量评价实验方法。2004年版的实验操作指南修订版总结了最新的Y染色体相关的临床资料(经典的部分基因区域特异性缺失、基因型与表型的相关性、检测方法)并对质量控制结果加以阐述。2013年9月19-21日犹他州佛罗伦萨开展的“男性不育遗传学”圆桌会议上,专家们就Y染色体微缺失检测临床应用指导意见达成共识,结合12年的临床积累和专家共识再次更新Y染色体微缺失的分子诊断操作指南。新指南重点包括:目前在少精子症或无精子症男性中发现的Y染色体缺失区域只有AZFa、AZFb、AZFbc、AZFc区,假定的独立AZFd区并不存在;AZFc区中gr/gr缺失是影响精子生成的一个危险因素,但临床意义尚存争议,未成为常规筛查指标;检测位点增加并不能提高检测灵敏度,反而可能使结果复杂化;基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个无精子因子(azoospermia factor, AZF)缺失检测。EAA/EMQN十二年国际质量评估计划(EQA)实施结果表明诊断错误率(错误的表型描述可能会导致错误诊断)急剧下降,从开始的前5年的8%到现在的1-2%,且评估诊断报告质量也有提升。总之,EQA计划非常成功,改善了参与实验室的实验操作,提高了其报告质量,且降低了误诊率。强烈建议国内AZF检测实验室加入EQA计划,完善中国Y染色体微缺失检测规范。

            4、透景Y染色体微缺失检测,历经3代产品更新,始终符合指南要求
            透景科技拥有十多年的Y染色体微缺失产品经验,研发初衷仅为科研服务,但透景研发人员从最初就不是盲从市场,考虑到中国目前在该领域并没有相应的检测指南,为了规避临床风险,在产品研发之初就选择欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控作网Y染色体微缺失检测操作指南作为参考,3代产品上市都随着指南更新升级做了相应方法学的改变。从最初的电泳法,到之后的熔解曲线法再到最新的荧光PCR方法,方法学一直在优化更新,但始终坚持指南建议6个STS位点(AZFa: sY84,sY86、AZFb:sY127,sY134和AZFc:sY254,sY255)检测,因为这6个STS几乎可以检测所有临床相关和文献报道的三个AZF区域95%以上的缺失,完全可以满足实验室常规检测,且其操作简单,在不同档次实验室都可以开展。
            透景第三代基于荧光PCR方法学开展的Y染色体微缺失检测,于15年1月份获得CFDA认证,是国内第一家获得认证可用于临床的Y染色体微缺失检测试剂。采用实时荧光PCR检测,免去了繁琐的电泳跑胶步骤,简单快捷的操作解放了实验人员的双手。而数字化结果,彩色的S形曲线一目了然,大大降低的认为误判的概率,整个检测完成仅需两个小时。目前很多大的医院如北医三院生殖中心,上海长海医院开始使用透景该产品,帮助不育患者查明病因,少花冤枉钱。
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